产品货号:
GL1193
中文名称:
DNase I
英文名称:
Deoxyribonuclease I, RNase-free
产品规格:
2kU
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品由DNase I、酶保护液、防腐剂等组成,浓度为2000U/mL,不含RNase,用于单链DNA、双链DNA、染色质、RNA:DNA杂交链,该试剂多用于无DNA污染的RNA的制备,逆转录及体外转录等实验。
脱氧核糖核酸酶I(DNase I)是一种非特异性核酸内切酶,大多数来源于重组E.coli菌株,含有牛胰腺DNase I的MBP融合克隆,DNase I可用于降解单链或双链DNA,其原理为DNase I水解磷酸二酯键产生带有5'-磷酸基团和3'-OH的单核苷酸或寡核苷酸。Mg2+或Mn2+可以激活DNase I的活性,Ca2+浓度的变化影响酶的活性;Mg2+存在时可以随意剪切DNA双链的任意位点,Mn2+存在时可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端,或1~2个核苷酸突出的粘末端。
1单位是指在50μL反应体系中,37℃条件下,10min能完全降解1μg pBR322 DNA所需的酶量。
组分 | 2KU | 10KU | 保存 |
DNase I | 1mL | -20℃,避光 | |
10×DNase Buffer | 5mL | -20℃ | |
RNase-Free ddH2O | 50mL | RT |
保存:-20℃,避光,有效期1年。
- 应注意避免污染和反复冻融。
- 试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
- 取DNase I平衡至室温,低速离心,使液体沉至管底待用,根据不同实验,应加入适量的酶,以便充分消化DNA,一般1U酶可消化小于1μg的DNA。
- 取DNase I 2~5μL(即4~10U),加入10×DNase Buffer 10μL以及待处理液(一般小于4~10μg),最后用去离子水或RNase-Free ddH2O补至100μL。
- 25~37℃孵育10min。
- 灭活条件:75℃孵育10min。
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